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　　靈芝(Ganoderma lucidum)屬于多孔菌科靈芝屬，是一種名貴的藥用真菌。靈芝中含有多種活性成分如多糖、甾類、三萜類、堿基、核苷、硬脂酸、苯甲酸、蟲漆酸、有機鍺以及多種生物堿等。靈芝有調節免疫、抗腫瘤、抗癌、改善血液循環，滋補、健腦、強壯、消炎、利尿等功效。我國野生靈芝資源豐富，大部分林區均有分布，據記載有90多種，分布于國內23個省市，14種已被開發利用。隨著靈芝市場需求的快速增長，野生靈芝資源已遭到過度采摘和破壞，有的品種已瀕臨滅絕，目前各靈芝產區應加大保護力度，有序開采，嚴禁亂采亂挖以保護野生靈芝種群及生物遺傳多樣性，另外可通過對野生靈芝的引種馴化栽培和仿野生栽培等技術手段進行合理開發利用�，F通過多年的試驗探索，對野生靈芝分離、純化、栽培形成完整的技術方案，供生產參考。

　　1 野生靈芝的菌種分離及篩選

　　1．1 培養基配制

　　野生靈芝組織分離采用PDA培養基，配方：馬鈴薯200 g，葡萄糖2O g，瓊脂2O g，水1 000 mL。將馬鈴薯切片加水煮沸30 min，4層紗布過濾后定溶至1 000 mL，在濾液中加入瓊脂、葡萄糖，分裝到18 mmX 180 rnrn試管中，121℃滅菌0．5 h后擺斜面。

　　1．2 野生靈芝的組織分離

　　選取野外采摘的幼嫩靈芝子實體用無菌水清洗表面，然后用75 酒精棉球進行表面消毒，在超凈工作臺內(如無超凈臺可在自制的簡易接種箱內)用滅菌的手術刀將靈芝菌蓋從中間分開，將菌蓋內部菌肉分割成5 mm見方的小塊，用滅菌的鑷子將菌塊接種到PDA斜面培養基上。接種后放入25~C恒溫培養箱培養。

　　1．3 菌種篩選

　　分離接種3～5 d后可見菌塊周圍長出白色菌絲并開始在培養基上蔓延生長，去除雜菌污染的試管，10～15 d后可長滿試管斜面。篩選出菌絲潔白濃密、氣生菌絲多的試管進行繼代培養。

　　1．4 菌種繼代培養

　　繼代培養可采用PDA培養基和棉籽殼培養基。棉籽殼培養基配方 為：棉籽殼100 g，麥麩10 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，將棉籽殼、麥麩文火煮50 min，4層紗布過濾后定溶至1 000 mL，其它步驟同PDA培養基。將篩選出的分離菌種無菌分割成5 mmX7 mm菌塊接種到繼代培養基上，25℃恒溫培養7～10 d可長滿試管斜面，如此繼代培養2～3次，每次都去除雜菌污染的菌種，篩選出長勢好的菌種，可作為栽培用的母種。

　　2 引種的野生靈芝栽培試驗

　　菌種分離成功后為鑒定菌種純度及驗證是否具有出芝能力，需要進行出芝試驗，并且通過試驗篩選出產量高、抗病抗雜能力強的菌株。

　　2．1 原種及栽培種的制作

　　2．1．1 原種及栽培種配方①棉籽殼培養基：棉籽殼78 ，麥麩2O ，蔗糖1 ，石膏1％。②木屑培養基：闊葉木屑78 ，麥麩2O ，蔗糖1％ ，石膏1 。③ 玉米粒培養基：玉米粒97 ，蔗糖1 ，石膏l ，碳酸鈣1 。④麥粒培養基：麥粒97 ，蔗糖1 ，石膏1 ，碳酸鈣1 。

　　2．1．2 原種的制作及接種配方①、② 的制作方法：將培養料混勻，按料：水一1：1．5加水拌勻后裝入500 mL罐頭瓶，用聚丙烯薄膜封口，121℃滅菌1．5 h。配方③ 、④ 的制作方法：分別將玉米粒和麥粒煮至無白心撈出稍晾干后加入其它材料拌勻后裝入500 mL罐頭瓶，用聚丙烯薄膜封口，121℃滅菌1．5 h。原種瓶滅菌冷卻后在超凈工作臺內接人靈芝母種，25"C恒溫培養30~40 d可長滿瓶。

　　2．1．3 栽培種制作如果大規模栽培要制作栽培種，小規模栽培可直接用原種接種，栽培種可用33 cmX 17 cmX0．05 cm的聚丙烯塑料袋，制作同原種，121"C滅菌2 h，冷卻后在超凈工作臺內接人原種，25~C恒溫培養40 d可長滿袋。

　　2．2 栽培袋的制作

　　2．2．1 栽培料配方①棉籽殼培養基：棉籽殼83 ，麥麩15 ，蔗糖1 ，石膏1 。② 木屑培養基：闊葉木屑83 ，麥麩15 ，蔗糖1 ，石膏1 。③棉籽殼木屑培養基：棉籽殼45％，闊葉木屑38 ，麥麩15 ，蔗糖1％，石膏1 。④段木培養基：將直徑10 cm的闊葉樹干截成30 cm的木段。

　　2．2．2 栽培料培養基配制及接種①②③拌料同原種，配制后裝入33 cmX17 cmX0．05 cm的聚丙烯栽培袋，每袋裝折合干料500 g左右。④用水浸泡后裝入聚丙烯袋。121℃滅菌2 h，冷卻后在超凈工作臺內接入原種或栽培種，25℃恒溫培養30~45 d可長滿袋。

　　2．3 出芝試驗

　　2．3．1 出芝條件及方法菌絲滿袋后轉入菇房出芝，菇房可選擇日光溫室、塑料大棚或半地下式拱棚。出芝溫度控制在25~30℃，空氣濕度80 ～9O ，要有遮光設施，光照控制在三分陽七分陰，定時通風。出芝方式可采用直接開袋出芝和開袋覆土出芝2種方法。直接開袋出芝是菌袋移入菇房后結開扎袋口繩，留少許縫隙，當有原基出現后逐漸結開袋口，可順利出芝，缺點是菌棒容易失水，補水困難。覆土法是在菇房內開挖3 mX0．8 1XI×0．5 in的畦，將菌袋脫去袋膜豎直放入，菌棒間留3～5 cm間隙，用含腐殖質的園田土填實，澆透水后覆3 cm細土，10~20 d后可出芝。

　　2．3．2 菌株的篩選栽培出芝后篩選出生長快、抗污染能力強、產量高的菌株作為推廣栽培的品種。還可以根據不同的應用目的進行篩選。如作為藥材食用可選擇產量高菌蓋大菌肉厚的菌株；如制作盆景可選擇菌柄長菌蓋形狀和顏色好的菌株；如以采收孢子為目的可選擇產孢量大的菌株。對篩選出的菌株再進行2～3次栽培試驗以確定性狀的穩定性后可推廣生產。

　　3 引種的野生靈芝菌種復壯

　　菌種長期保存后生活能力下降，影響質量和產量。為了確保菌種的優良性狀和較強的適應能力，要進行復壯。

　　3．1 低溫保藏菌種及時轉管

　　菌種放在4℃冰箱中保藏，使菌種處于較低的生命活動水平，每隔4個月轉管1次，轉管后再繼續低溫保藏或使用。轉管時可經常更換培養基配方，適時變換培養基成分和比例，既可增強菌種活力，促進良種復壯，又可提高菌種成活率，提高產量。

　　3．2 組織分離提純復壯法

　　繼代保藏的菌種轉管超過6次以上會出現退化現象，可在栽培中選擇性狀穩定、抗雜菌能力強、產量高的菌株進行組織分離，以達到長期保藏菌種的目的。

　　3．3 孢子分離提純復壯法

　　選取即將產孢子的子實體一小塊菌褶朝下用鐵絲懸于無菌三角瓶口，孢子彈射后用無菌水稀釋，接種到PDA平板上培養，孢子萌發后挑取單孢子初生菌絲在PDA平板上進行配對，選取親和交配型，經檢驗為雙核菌絲的，移接試管中成為母種。再進行栽培試驗篩出性狀穩定的菌株。

　　4 靈芝的仿野生栽培

　　仿野生栽培是將培養室內發好菌的栽培袋在自然條件下利用山問林地進行人工栽培出芝，其產品具有野生靈芝的外觀和顏色，由于是從野外分離的菌種更適合當地的氣候環境因此可獲得高產，并且會積累更多的干物質，提高藥用活性成分的含量。

　　4．1 菌袋的制作和培養

　　培養料及菌袋制作、發菌培養同栽培試驗。

　　4．2 栽培方法

　　栽培季節選擇5～7月份溫度穩定在25~3o~C時進行。栽培場地要求排水通風良好，光照為三分陽七分陰的林下。開挖3 mX0．8 mX0．5 m的畦，將發好菌的菌棒脫去袋豎直放入畦內，菌棒間留3～5 cm間隙，用土填實，澆透水后覆3 cm細土，畦上搭建塑料小拱棚以利于保溫保濕，光照強時可用遮陽網覆蓋。管理時注意保持好溫度、濕度并及時通風，10～20 d可出現原基，再過20 d左右菌蓋完全展開時采收。

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